Informații generale – IHC ROS1
Cancerul pulmonar este o boala extrem de agresivă, producând peste 1.8 milioane de decese anual, fiind astfel pricipala cauză de mortalitate prin cancer, la nivel mondial. Atât persoanele fumatoare, cât și cele nefumatoare au un risc crescut de apariție a acestui tip de cancer.
Riscul de cancer crește odată cu perioada scursă de la inițierea obiceiului de a fuma, dar și cu numărul de țigarete fumate, pe zi.
În funcție de aspectul microscopic, cancerul pulmonar este clasificat în doua forme:
- small cell lung cancer (SCLC)
- non-small lung cancer (NSCLC)
NSCLC reprezintă 85% din totalul cancerelor pulmonare, cele mai frecvente subtipuri din aceasta clasa fiind: carcinomul scuamos, carcinomul cu celule mari si adenocarcinomul.
Evaluarea activității GENEI ROS1 în NSCLC
Gena ROS1 (c-ros oncogene 1) este localizată pe brațul lung al cromozomului 6 (6q22) și codifică o proteină membranară integrală de tip I, ROS1 (Represor of Silence), cu rol de receptor cu activitate de tip tirozinkinazică. Mutații ale genei ROS1 determină sinteza unor proteine al căror domeniu kinazic devine constitutiv activ, activând o serie de căi de semnalizare oncogenică, care vor controla proliferarea, supraviețuirea și semnalizarea celulară. Astfel inhibarea activității acestor enzime este o terapie eficientă împotriva cancerului.
Rearanjamentele genei ROS1 sunt raportate în 1 – 2% dintre adenocarcinoamele pulmonare, nu sunt moștenite sau prezente la naștere și sunt asociate cu o rată de răspuns mai mare la anumite terapii.
La unii pacienți cu cancer pulmonar gena ROS1 fuzionează cu porțiuni ale altor tipuri de gene, cea mai frecventă fiind cea cu gena CD74. Fuziunea CD74-ROS1 este implicată în carcinogeneza tumorilor pulmonare fără celule mici, glioblastom, angiosarcom, colangio-carcinom, cancer colorectal, hemangio- endoteliom epitelioid, adenocarcinom gastric, glioblastom, tumoră miofibroblastică inflamatorie, cancer ovarian. Alti parteneri de fuziune pot fi genele ALK și RET. În prezent, sunt cunoscuți 27 de parteneri de fuziune genică9.
Studii clinice actuale arată că adenocarcinomul pulmonar cu rearanjare ROS1 este sensibil la actiunea terapiei cu CRIZOTINIB, având o rată de răspuns de peste 70%. Această terapie este aprobată pentru tratamentul NSCLC cu confirmare a rearanjării genice ROS1, iar ghidurile actuale recomandă ca toți pacienții diagnosticați cu adenocarcinom pulmonar să fie testați pentru ROS1.
Indicaţiile terapiei cu CRIZOTINIB7:
- Tratamentul de prima intentie al adulţilor cu carcinom bronho-pulmonar, altul decât cel cu celule mici (NSCLC) avansat, pozitiv pentru kinaza limfomului anaplazic (ALK pozitiv).
- Tratamentul adulţilor cu neoplasm bronho-pulmonar, altul decât cel cu celule mici (NSCLC) avansat, tratat anterior, pozitiv pentru kinaza limfomului anaplazic (ALK pozitiv)
- Tratamentul adulţilor cu neoplasm bronho-pulmonar, altul decât cel cu celule
În cancerul NSCLC avansat, testarea ROS1 este indicată și în vederea inițierii terapiei cu alte molecule, cum ar fi Entrectinib (de preferat) și Ceritinib.
Specimen recoltat:
- fragmentele tisulare fixate în formol 10%;
- blocuri de parafină.
Metoda de lucru: Testele imunohistochimice se efectueză în sistem complet automat, utilizând sistemul BenchMark ULTRA (Ventana), cu respectarea protocoalelor recomandate de producător. Colorația imunohistochimică tip ROS1 (clona SP384) folosește un anticorp monoclonal produs împotriva proteinei codificate de gena ROS1, un receptor tip tirozin kinază (RTK). Reacția IHC se evidențiază în principal la nivel citoplasmatic și rar, membranar și nuclear.
Recipient de recoltare:
- recipiente cu formol tamponat 10% (adaptate pentru dimensiunile fragmentelor tisulare recoltate)
Stabilitate proba:
- fragmentele tisulare fixate în formol 10%, 24-72 ore
- blocuri de parafină – în mediu ambiental, protejate de umezeală și radiațiile solare
Interpretarea rezultatelor:
Raportul furnizează informații despre clona de anticorpi utilizată și confirmă/infirmă supraexpresia tip ROS1. Pe lamă, ROS1 va colora pneumocitele de tip II non-neoplazice din țesutul sănătos și tumoral8.
Colorație cu intensitate 0 (no staining)
Rezultatul obținut cu testului ROS1 trebuie integrat cu alte teste, în raportul histopatologic, pentru cazurile diagnosticate cu NSCLC.
Colorația IHC ROS1 are o sensibilitate de 100% și o specificitate de 92%, comparativ cu tehnica ISH tip FISH, ceea ce o face un instrument eficient în screening-ul pacientilor, pentru selectarea terapiei moleculare, în adenocarcinomul pulmonar7.
Referinte:
- Rikova K, Guo A, Zeng Q, et al. Global survey of phosphotyrosine signalling identifies oncogenic kinases in lung cancer. Cell 2007; 131, 1190-1203.
- Kerr KM, Bubendorf L, Edelman MJ, et al. Second ESMO Consensus Conference on Lung Cancer: pathology and molecular biomarkers for non-small-cell lung cancer. Ann Oncol. 2014; 25, 1681-90
- FDA News Release: FDA expands use of Xalkori to treat rare form of advanced non-small cell
- lung Page visited last time on 18 April 2016.
- Package Insert, VENTANA ROS1 (SP384) Rabbit Monoclonal Primary Antibody, English
- https://www.lung.org/lung-health-diseases/lung-disease-lookup/lung-cancer/symptoms-diagnosis/biomarker-testing/ros1
- https://ema.europa.eu/en/documents/product-information/xalkori-epar-product-information_ro.pdf
- https://nature.com/articles/modpathol2013192
- https://rochebiomarkers.be/content/media/Files/ROS1_IHC_guide_version_1.pdf
