Methotrexat

Informații generale

Methotrexatul este un agent antineoplazic care inhibă sinteza ADN-ului^1-3. Medicamentul își exercită efectele prin inhibarea competitivă a enzimei dihidrofolat reductază, scăzând astfel concentrațiile de tetrahidrofolat, esențiale pentru metilarea nucleotidelor pirimidinice și, prin urmare, rata de obținere a nucleotidelor pirimidinice și, în final, sinteza de ADN^3,4.

Methotrexatul este utilizat în tratamentul anumitor boli neoplazice, psoriazisului sever și artritei reumatoide, la adulți⁵. Methotrexatul este eficient împotriva tumorilor maligne caracterizate prin proliferarea rapidă a celulelor⁶. Au fost utilizate doze intermediare, până la doze mari de metotrexat, asociat cu leucovorină (factor citrovor sau acid folinic) în scopul cruțării celulelor non-tumorale, cu rezultate favorabile în tratamentul sarcomului osteogenic, leucemiei, limfomului non-Hodgkin, pulmonar și cancerului de sân⁷. Methotrexatul are un potențial de toxicitate gravă. De aceea, pacienții supuși tratamentului cu metotrexat sunt atent monitorizați, astfel încât apariția efectele toxice să fie detectată cu promptitudine⁸.

Recomandări pentru determinarea methotrexat

• determinarea eficientei eliminarii methotrexatului, prin depistarea concentrației sale crescute, la care acest medicament poate deveni toxic pentru organism.

Specimen recoltat – sânge venos^1,8

Prelucrare necesară după recoltare⁸

• Metotrexatul este sensibil la lumina fluorescentă. Pentru evitarea compromiterii probei se recomandă evitarea expunerii prelungite a specimenului la lumina directă.
• Proba trebuie centrifugată în decurs de 2 ore de la colectare.

Volum probă – 0.5 mL⁸

Cauze de respingere a probei⁸

• Specimen hemolizat

Stabilitate probă – timp de 14 zile la temperaturi de 2-8^oC⁸

Metodă – imunologică⁸

Valori de referință⁸

Concentrația netoxică a medicamentului după 72 de ore: <0,1 mmol/L

Concentrațiile serice de methotrexat sunt frecvent monitorizate în timpul terapiei cu doze mari (50 mg/m²). Valorile pentru concentrațiile serice non-toxice, sunt după cum urmează:

• Methotrexat < 10 mmol/l la 24 de ore după administrare
• Methotrexat < 1 mmol/l 48 de ore după administrare
• Methotrexat < 0.1 mmol/l 72 de ore după administrare

Limite și interferențe⁸

Probele provenite de la pacienții cărora li s-a administrat glucarpidază (carboxipeptidaza G2) cu doză mare de metotrexat nu trebuie testați, pentru evidențierea valorii methotrexatului. Concentrațiile de metotrexat trebuie masurate utilizând metoda de cromatografie lichidă cuplată cu spectrometria de masă, pentru a evita raportarea unor valori fals crescute ale methotrexatului, datorită unei interferențe cu glucarpidaza. După administrarea terapiei cu glucarpidază, poate dura cel puțin 5 până la 7 zile până când se vor putea valida valori de încredere ale methotrexatului seric, folosind teste imunologice.

Bibliografie

1. den Boer, E., Meesters, R. J., van Zelst, B. D., Luider, T. M., Hazes, J. M., Heil, S. G., & de Jonge, R. (2013). Measuring methotrexate polyglutamates in red blood cells: a new LC-MS/MS-based method. Analytical and bioanalytical chemistry, 405(5), 1673–1681. https://doi.org/10.1007/s00216-012-6581-7
2. Oosterom, N., de Jonge, R., Smith, D., Pieters, R., Tissing, W., Fiocco, M., van Zelst, B. D., van den Heuvel-Eibrink, M. M., & Heil, S. G. (2019). Changes in intracellular folate metabolism during high-dose methotrexate and Leucovorin rescue therapy in children with acute lymphoblastic leukemia. PloS one, 14(9), e0221591. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0221591
3. Mo, X., Wen, Y., Ren, B., Chen, J., Xu, C., Wang, X., Huang, M., & Chen, X. (2012). Determination of erythrocyte methotrexate polyglutamates by liquid chromatography/tandem mass spectrometry after low-dose methotrexate therapy in Chinese patients with rheumatoid arthritis. Journal of chromatography. B, Analytical technologies in the biomedical and life sciences, 907, 41–48. https://doi.org/10.1016/j.jchromb.2012.08.032
4. Goodman S. (2010). Measuring methotrexate polyglutamates. Clinical and experimental rheumatology, 28(5 Suppl 61), S24–S26.
5. Oosterom, N., Fiocco, M., Kloos, R., van der Sluis, I. M., Pieters, R., van Zelst, B. D., Smith, D., van den Heuvel-Eibrink, M. M., de Jonge, R., & Heil, S. G. (2020). The evaluation of red blood cell folate and methotrexate levels during protocol M in childhood acute lymphoblastic leukemia. BMC cancer, 20(1), 940. https://doi.org/10.1186/s12885-020-07422-y
6. Tsurusawa, M., Gosho, M., Mori, T., Mitsui, T., Sunami, S., Kobayashi, R., Fukano, R., Tanaka, F., Fujita, N., Inada, H., Koh, K., Takimoto, T., Saito, A., Fujimoto, J., Nakazawa, A., Horibe, K., & lymphoma committee of the Japanese Pediatric Leukemia/lymphoma Study Group (2015). Statistical analysis of relation between plasma methotrexate concentration and toxicity in high-dose methotrexate therapy of childhood nonHodgkin lymphoma. Pediatric blood & cancer, 62(2), 279–284. https://doi.org/10.1002/pbc.25305
7. Rajnics P, Kellner VS, Kellner A, Kellner A., Karadi E, Kollar B and Egyed M (2017). The Hematologic Toxicity of Methotrexate in Patients with Autoimmune Disorders. J Neoplasm, 2:1. doi: 10.217672576-3903.100010
8. Mayo Clinic. Mayo Medical Laboratories. Test Catalog. [on-line]: https://www.mayocliniclabs.com [Accesat la data de 18.07.2021]