Informaţii generale – NMP 22 (marker tumoral vezică urinară) – test cantitativ
Cancerul vezicii urinare ocupă locul 4 la bărbaţi şi locul 8 la femei între toate tipurile de cancer. Cu excepţia hematuriei nu există alte simptome precoce la pacienţii cu tumori vezicale. Pentru a exclude sau pentru a diagnostica cancerul vezicii urinare examinarea cistoscopică este obligatorie. Până nu demult citologia urinii a fost singura metodă neinvazivă folosită în mod frecvent. Sensibilitatea şi specificitatea citologiei urinare depind însă de stadiul în care se află tumora şi de morfologia celulelor proliferante.
Pentru detectarea şi monitorizarea cancerului vezicii urinare în stadiu avansat citologia urinară este un instrument sigur; totuşi cancerul vezicii urinare în stadiu incipient poate fi detectat numai în aproximativ 30% din cazuri2. Au fost efectuate mai multe încercări pentru a valida diverse teste neinvazive specifice cancerului vezicii urinare, unul dintre acestea fiind NMP221;7.
Proteinele matricei nucleare (nuclear matrix proteins NMP) alcătuiesc cadrul structural intern al nucleului celulelor. Această matrice serveşte drept “ancoră” pentru aparatul enzimatic implicat în procesele de replicare a ADN-ului, sinteză a ARN-ului şi legare a hormonilor. De asemenea proteinele NMP au rol în reglarea şi coordonarea expresiei genelor. Lucrările lui Fey şi Penman au demonstrat că expresia NMP variază în funcţie de tipul celulei de origine. Pornind de la această observaţie s-a arătat că în serul pacienţilor neoplazici există proteine NMP solubile în concentraţii mult mai mari decât la persoanele sănătoase.
Partin şi colaboratorii săi au demonstrat că modelul de expresie NMP este diferit în ţesutul prostatic normal în comparaţie cu hiperplazia prostatică benignă şi cancerul de prostată. Lucrări anterioare au identificat proteine NMP specifice pentru osteosarcom, cancerul de colon şi cancerul mamar. Aceste observaţii au indicat faptul că determinările NMP ar putea fi utile în monitorizarea pacienţilor cu diverse tumori.
Diversele proteine NMP prezintă specificitate de organ. NMP22 sau proteina aparatului mitotic nuclear (NuMA) se găseşte în celulele epiteliale umane unde asigură separarea corectă a materialului genetic în cursul mitozei. Concentraţia NMP22 în celulele uroteliului malign este de până la 80 ori mai mare decât în ţesuturile normale10. Proteina NMP22 este eliberată în urină ca urmare a apoptozei celulare9. Spre deosebire de citologia urinară, detecţia de antigen NMP22 nu depinde de recuperarea celulelor intacte3.
Există două tipuri de teste pentru NMP22 dezvoltate de firma Matritech: cantitativ şi calitativ9.
Determinarea cantitativă de NMP22 se efectuează printr-un test imunoenzimatic care utilizează anticorpi ce recunosc secvenţele majore ale proteinei aparatului mitotic nuclear (NuMA). Este necesară o probă de urină spontană stabilizată.
Utilitatea determinării NMP22
– în scop diagnostic la pacienţii cu simptome sau factori de risc pentru carcinom cu celule tranziţionale al vezicii urinare (valoarea cut-off este de 7.5 U/mL) în asociere cu (şi nu in locul) procedurile standard de diagnostic;
– în scop de monitorizare a pacienţilor cu tumori vezicale după tratamentul chirurgical în vederea depistării tumorilor oculte sau rapid recidivante (valoarea cut-off este de 10 U/mL)10.
Testul a fost aprobat de FDA în 1996 pentru a fi utilizat în stabilirea prognosticului şi monitorizarea tumorilor vezicale recurente (după intervenţia chirurgicală). In 2000 testul a primit aprobarea FDA şi pentru diagnosticul tumorilor vezicale.
Scopul studiilor efectuate a fost de a stabili sensibilitatea şi specificitatea testului în comparaţie cu citologia urinară. Deşi citologia prezintă o specificitate înaltă pentru cancerul de vezică urinară, principalul său dezavantaj constă în sensbilitatea sa scăzută pentru identificarea tumorilor neinvazive9.
In 3 studii separate care au înrolat aproximativ 400 de pacienţi, Soloway, Miyanaga şi Landman au demonstrat că testul NMP22 cantitativ prezintă o sensibilitate globală de 70-81% pentru detectarea tumorilor uroteliale recurente. Pentru citologie a fost raportată o sensibilitate de 10-40%. O descoperire importantă a fost aceea că NMP22 are o sensibilitate înaltă pentru tumorile neinvazive. Astfel, Miyanaga şi colaboratorii săi au demonstrat că sensibilitatea testului pentru tumorile superficiale este de 70%.
In comparaţie cu citologia NMP22 prezintă o specificitate mai mică. Carpinito, Soloway şi Landman au raportat o specificitate de 70-79% pentru NMP22, în timp ce citologia urinară atinge o specificitate de 90-94%. In practică acest lucru sugerează că NMP22 generează mult mai multe rezultate fals pozitive decât citologia9;12;13.
Referitor la rezultatele fals-pozitive pentru NMP22 Ponsky şi Sharma au arătat că folosirea unor criterii clinice de excludere creşte specificitatea testului până la 95% şi reduce implicit numărul cazurilor fals-pozitive. Trebuie menţionat, de asemenea, faptul că cistoscopia are o sensibilitate general acceptată de 80-85% şi este posibil ca o parte din rezultatele pozitive pentru NMP22 clasificate drept fals pozitive să reprezinte de fapt cazuri pozitive care nu au fost depistate la cistoscopie.
Criteriile clinice de excludere sunt următoarele:
- condiţii inflamatorii benigne (infecţii ale tractului urinar);
- calculi renali sau vezicali;
- prezenţa actuală sau în antecedente a unui corp străin;
- înterpunerea unui segment de intestin;
- prezenţa unei alte tumori urogenitale;
- proba de urină obţinută prin spălături vezicale9;14.
Soloway şi Miyanaga au arătat, de asemenea, că testul NMP22 are o valoare predictivă negativă foarte bună (86-94.9%); aceasta înseamnă că obţinerea unui rezultat negativ indică cu o probabilitate foarte mare absenţa unei tumori uroteliale9.
Eficacitatea testului pentru diagnosticul diferenţial al hematuriei a fost demonstrată de 3 studii la care au participat peste 700 pacienţi. Akaza, Miyanaga şi Carpinito au arătat că testul NMP22 are o sensibilitate de 85.7-90.9% pentru diagnosticul tumorilor uroteliale la pacienţii cu hematurie, în timp ce citologia urinară prezintă o sensibilitate de 50-54.5%.
In ceea ce priveşte monitorizarea tumorilor vezicale, Stampfer şi colaboratorii au arătat că NMP22 prezintă o sensibilitate de 67%, superioară citologiei urinare (40%). In plus, sensibilitatea testului a fost stratificată în raport cu stadiul tumorii: 59% pentru tumorile neinvazive şi 90% pentru cele agresive9.
Pregătire pacient – nu se recomandă folosirea testului după cistectomie totală, precum şi în primele 5 zile după o procedură invazivă (cistoscopie, cateterizare); recoltarea trebuie efectuată între orele 0 şi 12 în cazul monitorizării pacienţilor după tratamentul chirurgical10.
Specimen recoltat – o probă de urină spontană10.
Recipient de recoltare – kit de recoltare NMP22 (recipient cu stabilizator)10.
Cantitate recoltată – 10 mL urină; specimenul stabilizat are culoare albastru/verde10.
Cauze de respingere a probei – nestabilizarea probei; utilizarea unui stabilizator inadecvat10.
Prelucrare necesară după recoltare – urina trebuie stabilizată imediat după recoltare10.
Stabilitate probă – 2 săptămâni la 2-8°C. Proba nu se congelează.
Metodă – EIA (imunoenzimatică)10.
Valori de referinţă – < 7.5 U/mL (diagnostic)
< 10 U/mL (monitorizare)10.
Limita de detecţie: 2.1 U/mL10.
Limite şi interferenţe
Un rezultat pozitiv nu trebuie utilizat ca evidenţă a afectării maligne a tractului urinar, fără a fi coroborat cu procedurile standard de diagnostic11.
Valori crescute de NMP22 au fost raportate şi la persoane sănătoase, mai ales după un efort fizic extrem.
Au fost descrise creşteri ale marker-ului la pacienţi cu cistită interstiţială, infecţii de tract urinar, tumori renale pentru care se efectuează chimioterapie sistemică, după cistectomie totală.
Probele de urină provenite de la pacienţi care efectuează terapie intravezicală pot să nu fie relevante pentru prezenţa sau absenţa unui proces malign vezical10.
Bibliografie
1. A. Zippe, C. Pandrangi, L, Agarwa L – NMP22 is a Sensitive, Cost-Effective Test in Patients at Risk for Bladder Cancer. In Journal of Urology 161: 62-65, January 1999.
2. Del Nero A, Esposito N, Curro A, Biasoni D, Montanari E, Mangiarotti B, Trinchieri A, Zanetti G, Serrago M, Pisani E. – Evaluation of Urinary Level of NMP22 as a Diagnostic Marker for Stage pTa-pTl Bladder Cancer: Comparison with Urinary Cytology and BTA Test. In Eur Urol 1999; 35:93-97.
3. Grossman et al. In JAMA 293:810-816, 2005.
4. Grossman HB, Messing E, Soloway M, et al. Detection of bladder cancer using a point-of-care proteomic assay. In JAMA, 2005; 293:810-816.
5. Grossman HB, Soloway M, Messing E, et al. Surveillance for recurrent bladder cancer using a point-of-care proteomic assay. In JAMA 2006; 295:299-305.
6. Grossman HB and the NMP22 Clinical Investigation Group Surveillance of patients with a history of bladder cancer using a point-of-care proteomic assay. Program and abstracts of the American Urological Association 2006 Annual Meeting; May 20-25, 2006; Atlanta, Georgia.
7. H. Akaza, N. Miyanaga, et al. – Evaluation of Urinary NMP22 (Nuclear Matrix Protein 22) as a Diagnostic Marker for Urothelial Cancer – Screening for Urothelial Cancer in Patients with Microscopic Hematuria. In Jpn J Cancer chemotherapy 24(7): 837-842, 1997.
8. Katz G, Messing EM. Diagnosis of bladder cancer using a point of care proteomic assay: a multicenter study. In J Urol. 2005;173(4 suppl):230.
9. Kevin M Tomera. NMP22 BladderCheck Test: point-of-care technology with life- and money-saving potential. In Expert Rev.Mol. Diagn. 4(6), 783-794 (2004).
10. Laborator Synevo. Referinţele specifice tehnologiei de lucru utilizate. 2010. Ref Type: Catalog.
11. Laboratory Corporation of America. Directory of Services and Interpretive Guide. Nuclear Matrix Protein (NMP) 22. www.labcorp.com 2010. Ref Type: Internet Communication.
12. Landmann J, Chang Y, Kavalier E, Droller MJ, Liu BC-S – Sensitivity and Specificity of NMP22, Telomerase, and BTA in the Detection of Human Bladder Cancer. In Urology 52(3): 398-402, September, 1998.
13. N. Miyanaga, H. Akaza et al. – Clinical Evaluation of Nuclear Matrix Protein 22 (NMP22) in Urine as a Novel Marker for Urothelial Cancer. In Eur Urology 31: 163-168,1997.
14. Sharma S, Zippe C, Pandrangi L, Nelson D, Agarwal – A Exclusion Criteria Enhance the Specificity and Positive Predictive Value of NMP22 and BTA STAT. Journal of Urology 162:53-57, July 1999.
