Anticorpi anti-anexina V (IgM, IgG)

Informații generale: Anticorpi anti-anexina V (IgM, IgG)

Anticorpii anti-anexina V (IgM, IgG) sunt markeri de linia a doua în diagnosticul serologic al sindromului antifosfolipidic¹.

Sindromul antifosfolipidic (APS) este o boală autoimună caracterizată clinic prin episoade de tromboză (venoasă, arterială sau ambele) și/sau complicații obstetricale și prin prezența persistentă de anticorpi antifosfolipidici circulanți. APS poate însoți o afecțiune reumatismală, cum ar fi lupusul eritematos sistemic (LES), sau poate fi primar, fără o afecțiune reumatismală asociată.

Anticorpii antifosfolipidici sunt imunoglobuline direcționate fie împotriva fosfolipidelor, fie împotriva proteinelor plasmatice legate de fosfolipidele exprimate pe suprafața celulelor endoteliale sau a trombocitelor^1;2.

Conform criteriilor de clasificare revizuite și publicate în 2006 (Sapporo-Sydney), diagnosticul APS necesită asocierea cel puțin a unui criteriu clinic și a unui criteriu de laborator. Criteriile de laborator se referă la detectarea următorilor anticorpi antifosfolipidici:

•  lupus anticoagulant (LA), prezent la cel puțin 2 determinări la interval de 12 săptămâni;
• anticorpi cardiolipinici (aCL) IgG și IgM cu titruri >40 GPL/MPL, prezenți la cel puțin 2 determinări la interval de 12 săptămâni;
• anticorpi anti- β2-glicoproteina 1 (β2-GPI) IgG și IgM, cu titruri crescute (>percentila 99 a limitei superioare de referință) prezenți la cel puțin 2 determinări la interval de 12 săptămâni².

Detectarea acestor trei tipuri de anticorpi trebuie efectuată în paralel: în general, dacă nu este detectat nici unul dintre acești anticorpi diagnosticul de APS este improbabil, în timp ce detectarea mai multor tipuri de anticorpi se asociază cu forme mai severe de APS³.

Cu toate acestea, în practică pot fi întâlniți pacienți care prezintă semne clinice sugestive pentru APS, dar la care se obțin în mod repetat rezultate negative la cele trei teste menționate mai sus. Pentru definirea acestor cazuri a fost propus termenul de APS „seronegativ”⁴.

În situația unui APS „seronegativ” se poate recurge la efectuarea unor markeri serologici de linia a doua, cum ar fi: aCL IgA, β2-GPI IgA, anticorpi antifosfatidilserină, anti-fosfoetanolamină, anti-fosfatidilinozitol, anti-fosfatidilcolină, anti-fosfatidilglicerol, anti-acid fosfatidic, anti-anexină, anti-protrombină. Acești autoanticorpi „non-clasici” au fost asociați cu simptome sugestive de APS în studii limitate și nu au fost incluși în criteriile de clasificare pentru a păstra specificitatea diagnosticului^3;4.

Anexinele reprezintă o familie de 12 proteine înalt conservate capabile să lege fosfolipidele anionice într-un mod dependent de calciu. Dintre acestea, anexina V se remarcă ca un anticoagulant natural ce se găsește în principal la nivelul trofoblastului și celulelor endoteliale. Activitatea anticoagulantă marcată a acestei proteine se datorează cristalizării sale deasupra bistratului de fosfolipide membranare, formând un „scut” ce blochează accesul enzimelor coagulării la fosfatidilserină, inhibând astfel activarea cascadei coagulării. Anticorpii antifosfolipidici interferă cu legarea anexinei V la fosfolipide și cu fenomenul de cristalizare, accelerând reacțiile coagulării și favorizând apariția trombozelor^5;6;7.

Așa cum s-a arătat pe modele murine, anexina 5 este exprimată intens la nivelul placentei și se consideră că, datorită afinității sale crescute pentru fosfolipidele încărcate negativ, este necesară pentru menținerea integrității acesteia⁸.

Niveluri crescute de autoanticorpi anti-anexină V au fost descrise la 20-30% dintre pacienții cu LES. De asemenea, s-a sugerat că acești anticorpi ar fi asociați cu manifestările clinice de APS (tromboze și pierderi recurente de sarcină)^5;7.

Recomandări pentru determinarea anticorpilor anti-anexina V

Cazurile cu simptomatologie APS și markeri serologici de primă linie negativi. 

Suspiciunile clinice de APS sunt: episoade de tromboză venoasă sau arterială, survenite în special la pacienți tineri, în absența oricărui diagnostic alternativ sau a altei etiologii trombotice; complicații ale sarcinii (una sau mai multe pierderi de sarcină după săptămâna 10 cu făt morfologic normal, una sau mai multe nașteri premature înainte de săptămâna 34 cauzate de preeclampsie severă sau insuficiență placentară, sau 3 sau mai multe avorturi spontane înainte de săptămâna 10 de sarcină la care s-au exclus etiologiile cromozomiale, hormonale sau anatomice); evaluarea riscului trombotic la pacienții diagnosticați cu boli de țesut conjunctiv (în special LES); evaluarea unei trombocitopenii neexplicabile^8;9.

Pregătire pacient – jeun (pe nemâncate) sau postprandial (după mese)⁹.

Specimen recoltat – sânge venos⁹.

Recipient de recoltare – vacutainer fără anticoagulant cu/fără gel separator⁹.

Prelucrare necesară după recoltare – se separă serul prin centrifugare⁹.

Volum probă – minim 0.5 mL ser⁹.

Cauze de respingere a probei – ser intens hemolizat, lipemic sau puternic contaminat bacterian⁹.

Stabilitate probă – 6 luni la -20°C.

Metodă – LINA⁹.

Valori de referință – Anticorpi anti-anexină V IgG, IgM:  Negativ⁹.

Interpretarea rezultatelor

Bibliografie

1. ARUP Laboratories. Test Directory: Antiphospholipid Syndrome – APS. www.aruplab.com 2017. Ref Type: Internet Communication.
2. Miyakis S, Lockshin MD, Atsumi T, et al: International consensus statement on an update of the classification criteria for definite antiphospholipid syndrome (APS). In J Thromb Haemost 2006;4:295-306.
3. Quest Diagnostics. Laboratory Testing in the Identification of Antiphospholipid Syndrome. www.questdiagnostics.com. Ref type:Internet communication.
4. Conti F, Capozzi A, Truglia S, Lococo E, Longo A, Misasi R, Alessandri C, Valesini G, Sorice M. The Mosaic of “Seronegative” Antiphospholipid Syndrome. J Immunol Res. 2014;2014:389601.
5. Misasi R, Capozzi A, Longo A, Recalchi S, Lococo E, Alessandri C, Conti F, Valesini G, Sorice M. “New” antigenic targets and methodological approaches for refining laboratory diagnosis of antiphospholipid syndrome. J Immunol Res. 2015;2015:858542
6. Rand JH, Wu XX, Quinn AS, Ashton AW, Chen PP, Hathcock JJ, Andree HA, Taatjes DJ. Hydroxychloroquine protects the annexin A5 anticoagulant shield from disruption by antiphospholipid antibodies: evidence for a novel effect for an old antimalarial drug. Blood. 2010 Mar 18;115(11):2292-9.
7. Scholz P, Auler M, Brachvogel B, Benzing T, Mallman P, Streichert T, Klatt AR. Detection of multiple annexin autoantibodies in a patient with recurrent miscarriages, fulminant stroke and seronegative antiphospholipid syndrome. Biochem Med (Zagreb). 2016;26(2):272-8.
8. Bizzaro N, Tonutti E, Villalta D, Tampoia M, Tozzoli R. Prevalence and clinical correlation of anti-phospholipid-binding protein antibodies in anticardiolipin-negative patients with systemic lupus erythematosus and women with unexplained recurrent miscarriages. Arch Pathol Lab Med. 2005 Jan;129(1):61-8.
9. Laborator Synevo. Referințele specifice tehnologiei de lucru utilizate 2017. Ref Type: Catalog