HTLV – ADN proviral

Informații generale

Virusul limfotrop cu celule T umane de tip 1 (HTLV-1) este un oncovirus extrem de mutagen (cancerigen) care afectează aproximativ 5-20 de milioane de oameni, în întreaga lume¹. Două tipuri de HTLV sunt cel mai frecvent testate: HTLV 1 şi HTLV 2.  Infecțiile cu HTLV-1 pot fi întâlnite în întreaga lume, cu prevalență ridicată în partea de sud-vest a Japoniei, Africa sub-sahariană, America Latină și Caraibe³.

HTLV-1 este endemic în primul rând în mediile cu resurse economice limitate³. Virusul este asociat cu un limfom/ leucemie cu celule T CD4+ la adulți (ATLL) agresiv dar și cu boli inflamatorii cum ar fi uveita HTLV I, dermatita infecțioasă, artropatia⁴.  Infecţia cu HTLV 1 poate fi transmisă de la mamă la făt, în timpul sarcinii sau în timpul alăptării⁵. Atât infecţiile cu HTLV 1 cât şi HTLV 2, pot fi transmise pe cale sexuală sau în timpul manipulării produselor cu sânge contaminat.

Ambele tipuri virale pot trece în sânge în timpul transfuziilor sau al transplantului de organe. Atât HTLV 1, cât şi HTLV 2 infectează cu precădere limfocitele T. Majoritatea persoanelor infectate nu prezintă simptome, însă pot fi cu potenţial infecţios pentru alţii⁵. După infecţia iniţială virusul nu dispare complet, rămânând în organism în formă latentă⁶. După infecția initială, un mic procent dintre cei care sunt infectaţi vor dezvolta una sau mai multe boli severe asociate.

Virusul limfotrofic al celulelor T umane de tip I (HTLV-1) a fost identificat ca agent cauzator al leucemiei/ limfomului cu celule T la adulți (ATLL) și al paraparezei spastice tropicale/mielopatiei asociate cu HTLV-1 (TSP/HAM). Acest virus a fost, de asemenea, legat de alte boli inflamatorii, inclusiv mai multe boli autoimune, cum ar fi artropatia inflamatorie cronică și sindromul Sjögrens, polimiozita, uveita, alveolita și dermatita infecțioasă.

Cea mai mare problemă, datorată infecției cu HTLV-1 este că aceasta se asociază cu o perioadă prelungită de incubație asimptomatică (între 15-20 de ani) cu o frecvență în dezvoltarea manifestărilor clinice mai mică de 5%. Virusul limfotrofic al celulelor T umane de tip II (HTLV-2), deși cu o frecvență foarte scăzută, a fost, de asemenea, legat de neoplasmele cu celule T. HTLV-1/2 nu se găsește în mod obișnuit liber în plasmă, dar este integrat în ADN-ul gazdei.

Diagnosticul infecțiilor cu HTLV-1/2 se face inițial prin detectarea anticorpilor specifici anti-HTLVI/II în ser sau plasmă prin teste de screening, cu confirmarea ulterioară prin alte tehnologii. Cu toate acestea, o proporție semnificativă de teste de screening, reactive (pozitive) pentru HTLV-1/2 duc la un profil serologic nespecific, care trebuie confirmat. Indivizii cu aceste rezultate sunt clasificați serologic ca nedeterminați pentru diagnosticul infecției cu HTLV-1/2.

Tehnicile actuale de laborator pentru măsurarea sarcinii provirale HTLV-1 dar și confirmarea rezultatelor serologice, se bazează pe testare de tip  PCR.^7,8.

Recomandări pentru determinarea HTLV ADN proviral⁵

• Mama al cărei copil a fost diagnosticat cu infecţie HTLV
• Partenerii sexuali ai unei persoane la care s-a confirmat o infectie HTLV
• Sangele provenit de la donatori
• Transplant de celule progenitoare, organe solide și țesuturi
• Persoanele care au factori de risc/simptome, cu suspicionarea de infecție HTLV, cum ar fi: uveita, dermatita sau artrita
• Screening la donatorii de ovule și material seminal.

Specimen recoltat – sânge venos⁷

Recipient de recoltare – vacutainer cu anticoagulant de tip EDTA⁷

Volum probă –1 mL⁷

Cauze de respingere a probei⁷

• Specimen hemolizat
• Specimen recoltat pe heparină

Stabilitate probă – timp de 7 zile la temperaturi cuprinse între 2-8^oC⁷

Metodă : RT-PCR⁷

Interpretare rezultate: negativ/pozitiv

 Bibliografie

1. Katsuya, H., Islam, S., Tan, B., Ito, J., Miyazato, P., Matsuo, M., Inada, Y., Iwase, S. C., Uchiyama, Y., Hata, H., Sato, T., Yagishita, N., Araya, N., Ueno, T., Nosaka, K., Tokunaga, M., Yamagishi, M., Watanabe, T., Uchimaru, K., Fujisawa, J. I., … Satou, Y. (2019). The Nature of the HTLV-1 Provirus in Naturally Infected Individuals Analyzed by the Viral DNA-Capture-Seq Approach. Cell reports, 29(3), 724–735.e4. https://doi.org/10.1016/j.celrep.2019.09.016
2. Matsumoto, C., Sagara, Y., Sobata, R., Inoue, Y., Morita, M., Uchida, S., Kiyokawa, H., Satake, M., & Tadokoro, K. (2017). Analysis of HTLV-1 proviral load (PVL) and antibody detected with various kinds of tests in Japanese blood donors to understand the relationship between PVL and antibody level and to gain insights toward better antibody testing. Journal of medical virology, 89(8), 1469–1476. https://doi.org/10.1002/jmv.24802
3. He, X., Maranga, I. O., Oliver, A. W., Gichangi, P., Hampson, L., & Hampson, I. N. (2016). Analysis of the Prevalence of HTLV-1 Proviral DNA in Cervical Smears and Carcinomas from HIV Positive and Negative Kenyan Women. Viruses, 8(9), 245. https://doi.org/10.3390/v8090245
4. Kamihira, S., Sugahara, K., Tsuruda, K., Minami, S., Uemura, A., Akamatsu, N., Nagai, H., Murata, K., Hasegawa, H., Hirakata, Y., Takasaki, Y., Tsukasaki, K., & Yamada, Y. (2005). Proviral status of HTLV-1 integrated into the host genomic DNA of adult T-cell leukemia cells. Clinical and laboratory haematology, 27(4), 235–241. https://doi.org/10.1111/j.1365-2257.2005.00698.x
5. UK. Infectious diseases. Guidance. Human T-cell lymphotropic virus (HTLV) types 1 and 2. [on-line]: https://www.gov.uk/guidance/human-t-cell-lymphotropic-virus-htlv-types-1-and-2
6. Montanheiro, P. A., Oliveira, A. C., Posada-Vergara, M. P., Milagres, A. C., Tauil, C., Marchiori, P. E., Duarte, A. J., & Casseb, J. (2005). Human T-cell lymphotropic virus type I (HTLV-I) proviral DNA viral load among asymptomatic patients and patients with HTLV-I-associated myelopathy/tropical spastic paraparesis. Brazilian journal of medical and biological research = Revista brasileira de pesquisas medicas e biologicas, 38(11), 1643–1647. https://doi.org/10.1590/s0100-879×2005001100011
7. Becherer L, Hess JF, Frischmann S, Bakheit M, Nitschko H, Stinco S, Zitz F, Hofer H, Porro G, Hausladen F, Stock K, Drossart D, Wurm H, Kuhn H, Huber D, Hutzenlaub T, Paust N, Keller M, Strohmeier O, Wadle S, Borst N, Zengerle R, von Stetten F (2021). Point-of-Care System for HTLV-1 Proviral Load Quantification by Digital Mediator Displacement LAMP. Micromachines; 12(2):159. https://doi.org/10.3390/mi12020159
8. Grassi, M. F., Olavarria, V. N., Kruschewsky, R., Mascarenhas, R. E., Dourado, I., Correia, L. C., de Castro-Costa, C. M., & Galvão-Castro, B. (2011). Human T cell lymphotropic virus type 1 (HTLV-1) proviral load of HTLV-associated myelopathy/tropical spastic paraparesis (HAM/TSP) patients according to new diagnostic criteria of HAM/TSP. Journal of medical virology, 83(7), 1269–1274. https://doi.org/10.1002/jmv.22087